PCR实验室建设规划方案

PCR实验室(Polymerase Chain Reaction)又叫作临床基因扩增室。是一种分子生物学技术，用于放大特定的DNA片段，可看作生物体外的特殊DNA复制。用于作检测艾滋病毒、乙型肝炎、禽疫或感染性病毒的一种手段。通过DNA基因追踪系统，能迅速掌握患者体内的病毒含量，其精确度高达纳米级别。该检测具有灵敏度高、快捷、特异性高、对样品要求低等优点，因此被临床医生广为认可，已广泛应用于医院的临床诊断和各防疫检测部门的禽疫病诊断。由于检测结果的安全、可靠、准确性高，PCR实验室的建设渐得重视和兴建。

PCR临床基因扩增检验实验室的建设与规划设计方案，是打造合理、科学、规范的实验室建设前重要的一道工作。并且建设前一定要明确考虑到当中的面积预算多大的问题。 

平面布置、通风空调系统设计、污染的预防与控制几个方面是（ＰＣＲ）基因扩增实验室设计的主要特点和应注意的问题。 

1.PCR检验实验室设计的核心问题是避免和控制污染的问题。PCR实验室的平面布局、空调通风系统设计、实验室的洁净度与气流控制等都是围绕这个核心问题进行的。 

2.PCR实验室平面布局 

PCR检验实验室原则上分为四个单独的工作区域： 

试剂贮存和准备区、标本制备区、扩增反应混合物配制和扩增区、扩增产物分析区。 

为避免交叉污染，进入各个工作区域必须严格遵循单一方向进行，即只能从试剂贮存和准备区→标本制备区→扩增反应混合物配制和扩增区→扩增产物分析区。 各实验区之间的试剂及样品传递应通过传递窗进行。  

 

3. 实验室空调通风系统设计及压力控制 

PCR实验室并没有严格的净化要求，但是为避免各个实验区域间交叉污染的可能性，宜采用全送全排的气流组织形式。同时，要严格控制送、排风的比例以保证各实验区的压力要求。 

a. 标本制备区 

该区域主要进行的操作为临床标本的保存、核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩增反应管和测定RNA时cDNA的合成。 

本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为正压，以避免从邻近区进入本区的气溶胶污染。另外，由于在加样操作中可能会发生气溶胶所致的污染，所以应避免在本区内不必要的走动。 

b. 试剂贮存和准备区 

该实验区主要进行的操作为贮存试剂的制备、试剂的分装和主反应混合液的制备。试剂和用于标本制作的材料应直接运送至该区，不得经过其他区域。试剂原材料必须贮存在本区内，并在本区内制备成所需的贮存试剂。 

对与气流压力的控制，本区并没有严格的要求。 

c.扩增反应混合物配制和扩增区 

该区域主要进行的操作为DNA或cDNA扩增。此外，已制备的DNA模板和合成的cDNA(来自样本制备区)的加入和主反应混合液(来自试剂贮存和制备区)制备成反应混合液等也可在本区内进行。在巢式PCR测定中，通常在第一轮扩增后必须打开反应管，因此巢式扩增有较高的污染危险性，第二次加样必须在本区内进行。 

本区的压力梯度要求为：相对于邻近区域为负压，以避免气溶胶从本区漏出。为避免气溶胶所致的污染，应尽量减少在本区内的不必要的走动。个别操作如加样等应在超净台内进行。 

d.扩增产物分析区 

该区域主要进行的操作为扩增片段的测定。如使用全自动封闭分析仪器检测，此区域可不设。 

本区是最主要的扩增产物污染来源，因此对本区的压力梯度的要求为：相对于邻近区域为负压，以避免扩增产物从本区扩散至其它区域。 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

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